Въведение
Методът на индиректното преброяване се нарича още метод за преброяване на живи бактерии. Неговият принцип е, че всяка жива бактерия може да расте, за да образува колония при подходяща среда и добри условия за растеж. Разредете пробата за тестване чрез серия от 10-кратни разреждания и след това изберете три разреждания на бактериален разтвор, съответно вземете 0,2 ml в стерилна плака, след това изсипете подходящо количество разтопена и охладена до около 45 ℃ среда и бактерии След като течността се смеси, охлади и втвърди, поставете я в инкубатор или оранжерия при подходяща температура за култивиране и пребройте бактериите, след като са пораснали.
Примери
Брой жизнеспособни клетки на милилитър от оригиналния бактериален разтвор = повече от три повтарящи се плаки при едно и също ниво на разреждане
среден брой колонии × фактор на разреждане × 5
Този метод може също така да вземе 0,2 ml от разредения бактериален разтвор и да го добави към подготвената плоча и след това да използва стерилен разпределител, за да разпръсне бактериалния разтвор по цялата повърхност на плочата, да го постави при подходяща температура за култивиране и да изчисли броя на колониите, и след това изчислете общия брой жизнеспособни бактерии на милилитър от първоначалната бактериална течност съгласно горната формула.
Метод
Този метод може да причини замърсяване поради неквалифицирана работа или да причини нестабилни резултати поради прекомерна температура на средата и увреждане на клетките. Независимо от това, тъй като този метод може да измерва броя на микробите в пробата, той все още е ефективен метод за измерване на броя на бактериите, който обикновено се използва в преподаването, научните изследвания и производството. Количеството бактерии, дрожди, пъпки и спори, съдържащи се в почвата, водата, млякото, храната и други материали, може да бъде определено с този метод. Но не е подходящ за измерване на нишковидни микроорганизми в проби, като актиномицети или нишковидни гъби или нишковидни цианобактерии и други вегетативни тела.
В допълнение към горните два често използвани метода за броене, има метод на мембранна филтрация и турбидиметричен метод. Методът на мембранна филтрация е да премине определен обем езерна вода, морска вода или питейна вода през мембранния филтър, когато броят на бактериите в пробата е много малък. След това филтърната мембрана се изсушава, оцветява и обработва, за да стане мембраната прозрачна, след което броят на бактериите върху мембраната (или в определена област) се изчислява под микроскоп; принципът на турбидиметрията е концентрацията на клетките в бактериалната суспензия да е в определен диапазон. Мътността е право пропорционална на оптичната плътност. Колкото повече бактерии, толкова по-голяма е оптичната плътност. Следователно, с помощта на спектрофотометър, при определена дължина на вълната, може да се измери оптичната плътност на бактериалната суспензия и оптичната плътност (O. D.) се използва за изразяване на количеството бактерии. Експерименталното измерване трябва да се контролира в линейния диапазон, където бактериалната концентрация е пропорционална на оптичната плътност, в противен случай то ще бъде неточно. Методът за микробно броене се развива бързо и има различни методи като бързи, прости и автоматизирани инструменти и устройства.
Като цяло, той включва метода за броене на плаката за разреждане, метода за броене на течността за разреждане и метода за броене на тънък слой.